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基因克隆与表达质粒构建

实验介绍

基因克隆

指发生在基因水平上的分子克隆(DNA克隆),即将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(克隆载体)中,再将该重组质粒转入大肠杆菌体内,使其随大肠杆菌增殖而进行复制。由于质粒具有不相容性,即同一类群的不同质粒不能在同一菌株内稳定共存,当细胞分裂时就会分别进入到不同的子代细胞,因此来源于一个菌株的质粒是一个分子克隆,而随质粒复制出的外源基因也就是一个分子克隆。DNA插入片段获得途径有逆转录-PCR、文库筛选、人工合成(适合小片段基因)。

真核表达质粒构建

将目的基因片段(1.cDNA文库;2.人工合成;3.PCR产物)通过合适的酶切位点构建到相应真核表达载体中,通过细胞转染的方式在真核宿主细胞内最终实现目的基因的表达。

服务流程

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客户提供

●   基因名称或序列号

●   逆转录-PCR方法合成cDNA需要提供细胞或组织样本

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服务优势

●   系统化的目的片段制备方案

●   专业化的基因克隆平台

●   高效的表达质粒构建流程

●   真实清晰完整的报告呈现


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