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定点突变

实验介绍

重叠延伸PCR法(gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)是指在PCR技术的基础上,采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,通过重叠链的延伸,将不同来源的片段重叠拼接起来的方法,利用该原理,可通过三步PCR程序实现针大片段的缺失或插入。

全质粒PCR定点突变是指通过PCR方法向质粒中的目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变。利用该方法既可以实现单点突变,也可以实现多点突变,目前常用的方法是采用stratagene公司的QuikChange Site-directed Mutagenesis kit或QuikChange Multi Site-directed Mutagenesis kit来完成。突变引物的设计及突变PCR反应为定点突变能否成功的关键影响因素。

服务流程

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客户提供

●   测序确认的野生型质粒(可由我司代购)、图谱及插入位点

●   待突变位点、突变后序列及载体信息

●   目的基因序列信息或基因名称或序列号

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服务优势

●   可实现长序列(>10kb)的点突变

●   可对高GC、重复、发卡结构进行突变


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