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原位杂交(In Situ Hybridization)

实验介绍

原位杂交包括DNA及RNA原位杂交,通过将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,而实现对DNA或RNA的定位。基本原理为在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知探针片段,按核酸杂交碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (Hybrids)经显色反应在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的DNA或RNA分子。

荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)因其所用探针荧光物质标记(间接或直接)而得名,基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性,通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶核酸进行分析。

根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类,可以在细胞标本或组织标本上进行。该方法的优点在于1) 能够用于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA的研究; 2)操作不需要从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性,并可完整地保持组织与细胞的形态,更能准确直接地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。

服务流程

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客户提供

●   细胞标本:新鲜固定的细胞爬/涂片,或培养细胞

●   组织/组织切片:新鲜组织(应在30min内实现固定);液氮保存样本;石蜡切片或冰冻切片

●   靶基因序列号

●   相关参考文献

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服务优势

●   专业化的细胞爬/涂片、切片制备技艺

●   标准化的原位杂交操作流程

●   先进的荧光显微拍摄系统

●   真实清晰完整的报告呈现


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