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数字PCR

实验介绍

数字 PCR(Digital PCR或dPCR)作为传统实时定量 PCR 的替代方法,可以实现绝对定量及稀有等位基因的检测。 数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割到几十、几万个单独、平行的 PCR 反应(将样品稀释到单分子水平),这些反应中有的包括靶标分子(阳性),有的不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多,数字PCR在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集,当不存在任何靶标序列时,没有信号累积,阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的绝对计数。此方法的优点:1)不依赖于扩增曲线的循环数,不受扩增效率的影响;2)不需要内参基因;3)绝对定量不需要标准曲线;4)很好的准确性及重现性。基于上述优点,数字PCR被越来越多的用于分子生物学检测,如突变/稀有变异检测、拷贝数变异检测、肿瘤组织核酸分析、基因表达分析、线粒体拷贝数与突变分析,同时还可以用于NGS的结果验证。

服务流程

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客户提供

●   细胞样本:细胞悬液(≥10^6)或冻存团块

●   组织样本:新鲜样本或液氮保存样本(≥300mg)

●   血液样本:≥1ml

●   核酸样品:DNA或RNA冻存样本(≥1μg,-80度保存6个月以内)

●   基因名称或序列号

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服务优势

●   高纯度的核酸提取技艺

●   专业的特异性引物设计方案

●   先进的数字PCR仪

●   标准化的dPCR操作流程

●   真实清晰完整的报告呈现


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